广州市城市管理综合执法条例
广东省广州市人大常委会
广州市城市管理综合执法条例
（2008年8月1日广州市第十三届人民代表大会常务委员会第十一次会议通过 2008年9月26日广东省第十一届人民代表大会常务委员会第五次会议批准）
广州市第十三届人民代表大会常务委员会
公 告
（第34号）
广州市第十三届人民代表大会常务委员会第十一次会议于2008年8月1日通过的《广州市城市管理综合执法条例》，业经广东省第十一届人民代表大会常务委员会第五次会议于2008年9月26日批准，现予公布，自2009年9月1日起施行。
广州市人民代表大会常务委员会
2009年7月24日
广东省人民代表大会常务委员会关于批准
《广州市城市管理综合执法条例》的决定
（2008年9月26日广东省第十一届人民代表大会常务委员会第五次会议通过）
广东省第十一届人民代表大会常务委员会第五次会议审查了广州市人民代表大会常务委员会报请批准的《广州市城市管理综合执法条例》。该条例与宪法、法律、行政法规和本省的地方性法规不抵触，决定予以批准，由广州市人民代表大会常务委员会公布施行。
第一章 总则
第一条 为规范城市管理综合执法行为，促进依法行政，保护公民、法人和其他组织的合法权益，根据《中华人民共和国行政处罚法》等有关法律、法规，结合本市实际，制定本条例。
第二条 本条例适用于本市市辖区内城市管理综合执法活动。
第三条 市、区城市管理综合执法机关是本级人民政府实施城市管理综合执法的行政机关，按照市人民政府规定的市、区职责分工，依法查处本管辖范围内的违法行为，并对其作出的具体行政行为承担法律责任。
市、区城市管理综合执法机关的派出机构，以市、区城市管理综合执法机关的名义实施城市管理综合执法。
第四条 市城市管理综合执法机关负责本条例的组织实施。
公安、司法行政、民政、国土房管、建设、交通、水务、卫生、环境保护、城乡规划、市政园林、市容环卫、工商、人民防空等相关部门，应当按照各自职责配合城市管理综合执法机关实施本条例。
第五条 根据国务院或者本省人民政府依照国务院的授权所作出的决定，城市管理综合执法机关行使市容环境卫生、城市绿化、城乡规划、市政、环境保护等方面法律、法规、规章规定的行政处罚权。
城市管理综合执法机关行使行政处罚权的具体范围，由市人民政府向社会公布。
第六条 市人民政府公布的城市管理行政处罚权由城市管理综合执法机关行使后，相关行政机关不得再行使，再行使的，其作出的行政处罚决定无效。
相关行政机关依法履行的其他行政管理职责，不因行政处罚权由城市管理综合执法机关行使而改变。
第七条 城市管理综合执法机关与相关行政机关对职责范围发生争议的，由市、区人民政府处理。
城市管理综合执法机关之间对管辖权发生争议的，由市城市管理综合执法机关指定管辖。
第八条 城市管理综合执法机关及其执法人员应当坚持公正、文明执法，坚持执法与教育、疏导、服务相结合，注重对违法行为的纠正和对违法行为人的教育。
第九条 城市管理综合执法机关实施行政处罚应当与违法行为的事实、性质、情节以及社会危害程度相当。违法行为轻微且当事人及时改正，没有造成危害后果的，不予行政处罚。
城市管理综合执法机关实施行政强制应当遵循当事人权益最小损失的原则，实施非强制性措施可以达到行政管理目的的，不应实施行政强制措施。
第十条 城市管理综合执法人员应当经过法律知识和业务知识培训，并取得省人民政府统一制发的行政执法证。
城市管理综合执法机关聘用的人员不得实施行政处罚和行政强制。
第十一条 市、区人民政府应当建立城市管理综合执法安全保障机制，提高装备水平，为执法人员的人身安全提供保障。
第二章 执法措施
第十二条 城市管理综合执法机关应当依照法律、法规规定的条件、程序实施行政处罚和行政强制。市城市管理综合执法机关应当依法制定执法操作规范，并向社会公布。执法操作规范应当体现文明执法的要求。
第十三条 城市管理综合执法人员在执行职务时应当按规定着装。
城市管理综合执法机关聘用的人员不得穿着与城市管理综合执法人员相同或者相近的制服。
第十四条 城市管理综合执法人员在执行职务时不得侵害当事人的合法权益，不得辱骂、威胁、殴打当事人，不得违法损毁当事人的物品。
第十五条 城市管理综合执法人员在调查、检查、收集证据和实施行政强制时不得少于两人，并向当事人或者有关人员出示行政执法证件。
第十六条 城市管理综合执法机关应当建立和完善日常巡查制度，及时发现和查处违法行为。
第十七条 城市管理综合执法机关应当建立和完善举报制度，向社会公布统一受理举报的电话、信箱、电子邮箱。城市管理综合执法机关收到举报应当登记并及时核实处理，对不属于本机关职责范围的，应当告知举报人向相关行政机关举报或者在七日内移送相关行政机关处理。
城市管理综合执法机关应当为举报人保密。有明确举报人的，应当在受理举报之日起六十日内将处理意见书面告知举报人。
城市管理综合执法机关对相关行政机关移送的行政执法案件，应当及时登记、核实处理并书面反馈处理意见。
第十八条 城市管理综合执法机关在查处违法行为时，可以采取以下措施：
（一）询问当事人、证人，并制作询问笔录。
（二）收集、调取物证。物证调取不便的，可以拍摄足以反映证据外形或者内容的照片、录像，并注明情况。
（三）对实施违法行为的场所进行勘验、拍摄现场照片、录音录像，制作检查笔录。
（四）法律、法规规定的其他措施。
城市管理综合执法人员、当事人、证人应当在第一款第一项、第三项规定的笔录上签名或者盖章。
第十九条 城市管理综合执法机关在证据可能灭失或者以后难以取得的情况下，经机关负责人批准，可以先行登记保存。
第二十条 城市管理综合执法机关实施先行登记保存，应当当场制作清单并交付当事人。清单应当由城市管理综合执法人员和当事人签名或者盖章。
先行登记保存的清单应当载明下列事项：
（一）当事人姓名或者名称、地址；
（二）先行登记保存的工具和其他物品的名称、种类、规格、数量和完好程度；
（三）当事人领回工具和其他物品的条件；
（四）行政机关的名称、印章和日期。
第二十一条 对先行登记保存的证据，城市管理综合执法机关应当在七日内作出处理决定，逾期不作出处理决定的，先行登记保存措施自动解除。
第二十二条 城市管理综合执法机关查处下列违法行为时，可以采取以下措施：
（一）对未取得建设工程规划许可证或者未按照建设工程规划许可证的规定进行建设，经责令停止建设或者限期拆除后，当事人仍不停止建设或者逾期不拆除的，可以在建设工程所在地县级以上地方人民政府批准后采取查封施工现场、强制拆除等措施。
（二）对依法应当办理而未办理建筑工程施工许可证施工，经责令停止施工，当事人仍继续施工的，可以查封、扣押施工工具；查封、扣押施工工具仍不足以制止违法行为的，可以书面通知供电、供水企业按照与当事人订立的合同中止用于施工的供电、供水；违法施工行为纠正后，应当在二十四小时内书面通知供电、供水企业恢复供电、供水。
（三）对违反市容环境卫生管理有关规定占用公共场所设摊经营、兜售物品的，应当劝告其自行改正。对市民多次投诉或者占用城市主干道两侧、城市广场、机场、火车站、汽车客运站场、客运码头、会展中心、商业步行街、各级党政机关周边等重要区域设摊经营、兜售物品，经劝告其自行改正仍拒不改正的，可以扣押其使用的工具和经营、兜售的物品。
（四）对违反市容环境卫生管理有关规定悬挂、张贴、涂写、刻画宣传品，经责令改正仍拒不改正的，可以扣押其使用的工具、宣传品，并可以通过宣传品中的通讯号码对当事人实施语音提示，要求当事人在规定期限内接受处理；当事人逾期未按要求接受处理的，可以书面通知通讯企业按照与当事人订立的合同中止服务。
城市管理综合执法机关发现前款规定以外的违法行为，应当当场责令改正；当场不能改正的，应当责令限期改正；拒不改正的，可以依法查封、扣押其工具和其他物品。
第二十三条 城市管理综合执法机关在查封、扣押之前，应当告知当事人事实、理由、依据、救济途径以及当事人依法享有的权利。
当事人有权进行陈述和申辩。当事人提出的事实、理由和证据成立的，城市管理综合执法机关应当采纳。
第二十四条 城市管理综合执法机关依法实施查封、扣押的，应当制作清单和查封、扣押决定书并当场交付当事人。清单应当记明被查封、扣押的工具和其他物品的名称、种类、规格、数量和完好程度等，由城市管理综合执法人员和当事人签名或盖章。
查封、扣押决定书应当载明下列事项：
（一）当事人姓名或者名称、地址；
（二）查封、扣押的理由和依据；
（三）查封、扣押物品的名称、数量和期限；
（四）申请行政复议或者提起行政诉讼的途径和期限；
（五）行政机关的名称、印章和日期。
第二十五条 城市管理综合执法机关实施查封、扣押的期限不得超过三十日；情况复杂的，经机关负责人批准，可以延长三十日。城市管理综合执法机关在法定期限内未作出处理决定的，查封、扣押措施自动解除。
违法行为不成立或者不再需要采取查封、扣押措施的，城市管理综合执法机关应当立即解除查封、扣押措施。
对违法事实清楚，依法应当没收的工具和其他物品，予以没收；法律、行政法规规定应当销毁的，依法销毁。
第二十六条 城市管理综合执法机关实施第十八条、第二十条和第二十四条规定的行为时，当事人拒绝签名、盖章或者不在现场的，应当由无利害关系的见证人签名、盖章见证或者由公证机构进行现场公证；见证人拒绝签名、盖章或者无见证人的，城市管理综合执法人员应当注明情况。
城市管理综合执法机关实施第二十条和第二十四条规定的行为时，当事人拒绝接受清单、查封决定书、扣押决定书或者不在现场的，城市管理综合执法机关应当在七日内邮寄送达、留置送达或者在其网站和公告栏公告送达。城市管理综合执法机关应当向社会公布其网址和公告栏地址。
第二十七条 城市管理综合执法机关对先行登记保存、查封、扣押的工具和其他物品，应当妥善保管，不得使用或者损毁。
当事人逾期不履行行政处罚决定的，城市管理综合执法机关可以根据法律规定，将查封、扣押的工具和其他物品拍卖抵缴罚款。
第二十八条 先行登记保存、查封、扣押措施已被解除或者自动解除的，城市管理综合执法机关应当在解除之日起三日内通知当事人领回工具和其他物品；无法通知的，应当在城市管理综合执法机关的网站和公告栏公告。通知或者公告领回的期限届满，当事人未领回的，城市管理综合执法机关应当及时发布招领公告，当事人应当在发布招领公告之日起六十日内领回。因逾期未领回所造成的损失，由当事人自行承担。
第二十九条 城市管理综合执法机关按照本条例的规定对易腐烂变质、鲜活产品和其他不易保存的食品实施先行登记保存、查封、扣押时，应当告知当事人在二十四小时内到指定地点接受调查和处理。当事人逾期不接受调查和处理的，对其中符合产品质量标准、食品卫生标准的物品，可以在登记后拍卖、变卖，所得价款按照第二十八条的规定处理；无法拍卖、变卖的，可以在登记后销毁，销毁过程应当通过拍照或者录（摄）像予以记录。
依法先行登记保存、查封、扣押的鲜活产品和其他不易保存的食品因其自然属性腐烂变质的，由两个以上城市管理综合执法人员拍照并注明情况，城市管理综合执法机关不承担赔偿责任。
第三十条 市、区人民政府应当采取措施引导流动商贩入场（室）从事合法经营。
第三章 执法协作
第三十一条 城市管理综合执法机关和相关行政机关应当建立健全信息共享机制，互相通报有关行政管理信息。
前款所指有关行政管理信息包括以下内容：
（一）相关行政机关实施与城市管理综合执法有关的行政许可事项和监督管理信息；
（二）城市管理综合执法机关实施行政处罚的情况和在执法中发现应当告知相关行政机关的信息；
（三）与城市管理综合执法有关的专项整治行动信息；
（四）其他需要共享的重要信息。
第三十二条 城市管理综合执法机关查处违法行为需要查询有关资料的，相关行政机关应当依法提供，不得收取费用。
需要相关行政机关提供专业意见的，相关行政机关应当自收到协助函件之日起七个工作日内出具书面意见；案情复杂，需要延期的，应当以书面形式向城市管理综合执法机关说明理由并明确答复期限。相关行政机关出具书面意见前需要城市管理综合执法机关补充资料的，应当一次性告知，补充资料所用时间不计入答复期限。
第三十三条 对城市管理综合执法中的重要专项行动，城市管理综合执法机关需要相关行政机关协助的，相关行政机关应当协助。
第三十四条 城市管理综合执法机关行使行政处罚权时，当事人拒绝配合调查取证、拒绝履行行政决定，严重影响行政管理秩序的，城市管理综合执法机关可以将有关情况告知相关行政机关，相关行政机关应当依法采取措施督促当事人履行义务。
第三十五条 相关行政机关对城市管理综合执法机关移送的行政执法案件，应当及时登记、核实处理并书面反馈处理意见。
第三十六条 公安机关对阻碍城市管理综合执法人员依法执行职务的行为，应当及时制止，并依照有关法律、法规的规定立案查处。
第三十七条 镇人民政府、街道办事处应当在调查取证、文书送达、行政强制执行、宣传教育、社区服务等方面支持城市管理综合执法机关进行城市管理综合执法。
第四章 执法监督
第三十八条 城市管理综合执法机关应当建立和完善行政执法监督机制，实行行政执法监督检查、评议考核、督办督察、责任追究等监督制度，监督城市管理综合执法机关及其执法人员依法履行职责、行使职权。
第三十九条 城市管理综合执法机关应当将职责范围、执法依据、执法程序、处罚标准以及监督电话等对外公开，接受社会监督。
公民、法人和其他组织发现城市管理综合执法人员在执法中有不当或者违法行为的，有权向其所在单位、上级行政机关或者监察机关检举、控告，接到检举、控告的机关应当及时核实处理，并在六十日内反馈处理意见。
第四十条 市、区人民政府应当依照行政执法监督的有关规定加强对城市管理综合执法的监督检查。
市城市管理综合执法机关发现区城市管理综合执法机关有不当或者违法的具体行政行为，应当责令改正或者撤销；发现其不履行执法职责的，应当责令改正或者直接查处。
第四十一条 相关行政机关发现同级城市管理综合执法机关有违法或者不履行法定职责等行为，应当向其提出书面建议，或者提请同级人民政府予以纠正。
城市管理综合执法机关发现同级相关行政机关有不配合执法或者不履行法定职责等行为，应当向其提出书面建议，或者提请同级人民政府予以纠正。
第五章 法律责任
第四十二条 城市管理综合执法机关及其执法人员有下列行为之一的，由其所在单位、上级行政机关或者监察机关对直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予行政处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任：
（一）不履行巡查职责，未能及时发现违法行为，或者发现后不制止，情节严重的；
（二）违法使用或者损毁先行登记保存、查封、扣押的工具、物品，给当事人造成损失的；
（三）粗暴执法，给公民人身或者财产造成损害、给法人或者其他组织造成损失的；
（四）未经举报人同意，泄漏举报人信息，情节严重的；
（五）帮助违法行为人逃避查处，情节严重的；
（六）在实施先行登记保存时，不依法送达清单，情节严重的；
（七）在实施查封、扣押时，不依法送达清单和查封、扣押决定书，情节严重的；
（八）将没收、查封、扣押的违法所得或者财物以及罚款截留、私分或者变相私分的；
（九）利用职务上的便利，索取或者收受他人财物的；
（十）玩忽职守，对应当予以制止或者处罚的违法行为不制止、不处罚，致使公民、法人或者其他组织的合法权益、公共利益遭受损害的。
第四十三条 城市管理综合执法机关不制止聘用人员实施行政处罚、行政强制，情节严重的，或者安排聘用人员实施行政处罚、行政强制的，由其上级行政机关或者监察机关对直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予行政处分。
城市管理综合执法机关聘用的人员违反本条例第十条的规定实施行政处罚、行政强制的，由其所在单位给予通报批评或者依照《中华人民共和国劳动合同法》的规定予以处理。
第四十四条 城市管理综合执法机关及其执法人员违法行使职权对公民、法人或者其他组织的合法权益造成损害的，应当依法承担赔偿责任。
第四十五条 相关行政机关违反本条例第三十二条、第三十三条、第三十四条和第三十六条的规定，不履行执法协作义务，造成严重后果的，由上级行政机关或者监察机关对直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予行政处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任。
镇人民政府、街道办事处违反本条例第三十七条的规定，造成严重后果的，由上级行政机关或者监察机关对直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予行政处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任。
第四十六条 阻碍城市管理综合执法人员依法执行职务的，由公安机关依照《中华人民共和国治安管理处罚法》的有关规定处罚。
以暴力、威胁方法阻碍城市管理综合执法人员依法执行职务的，依法追究刑事责任。
第六章 附 则
第四十七条 本市县级市的城市管理执法工作参照本条例执行。
第四十八条 本条例自2009年9月1日起施行。１９９8年１月１日起施行的《广州市城市管理监察条例》同时废止。
关于印发《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》的通知
国家食品药品监督管理局
关于印发《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》的通知
国药监注[2002]160号
各省、自治区、直辖市药品监督管理局：
为防止肝炎、艾滋病等血源性传播疾病随血液制品的应用而传播，保证临床使用安全，我局组织有关单位和专家制定了《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》，现予印发，请遵照执行并转发至辖区内各有关单位。
国家药品监督管理局
二○○二年五月九日
血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则
目前已知经血液制品传染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和细小病毒B19。尚未发现经血液制品传染CJD。但有少数研究报告发现有实验性传染现象，因此要密切关注CJD，特别是vCJD的发展动向。
为了提高血液制品安全性，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。本技术指导原则是对血液制品（指以人血浆为原料制备的制品）生产过程以及特定的去除/灭活病毒方法验证的指导原则，包括指示病毒和病毒去除/灭活方法的选择、验证方案的设计、结果判定以及附录所列技术验证申报的程序。
一、去除/灭活病毒方法的选择
由于不同类血液制品潜在的污染病毒的可能性不同，为此选择病毒去除/灭活方法的侧重点也应有所不同：
（一）凝血因子类制品
生产过程中应有特定的能去除/灭活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一种或多种方法联合去除/灭活病毒。
（二）免疫球蛋白类制品
对于免疫球蛋白类制品（包括静脉注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特异性人免
疫球蛋白）生产过程中应有特定的灭活脂包膜病毒方法。但从进一步提高这类制品安全性考虑，提倡生产过程中加入特定的针对非脂包膜病毒的去除/灭活方法。
（三）白蛋白
采用低温乙醇生产工艺和特定的去除/灭活病毒方法，如巴斯德消毒法等。
二、常用的去除/灭活病毒方法评价
（一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）
1．人血白蛋白制品
几十年临床应用结果表明，白蛋白的巴氏消毒法对HIV和肝炎病毒是安全的。其病毒
灭活条件已很完善，可不要求进行病毒灭活验证。但是必须对巴氏消毒法所用设施进行验证，使巴氏消毒各参数符合要求（包括制品内温度分布的均一性和灭活时间）。
2．其它血液制品（液体制剂）
由于制品的组成、稳定剂（如：氨基酸、糖、枸橼酸盐等）及其浓度的不同，均会对
灭活病毒效果有一定的影响。因此在采用巴氏消毒灭活病毒方法时必须进行病毒灭活效果验证。
（二）干热法（冻干制品）
80℃加热72小时，可以灭活HBV、HCV、HIV和HAV等病毒。但应考虑制品的水分
含量、制品组成（如：蛋白质、糖、盐和氨基酸）对病毒灭活效果的影响。应确定允许的制品瓶间各参数的差异。病毒灭活用的干热箱至少每半年验证一次。验证时干燥箱内应设多个测温点（包括制品内、箱内最高和最低温度点）。
（三）有机溶剂/去污剂（S/D）处理法
有机溶剂，如：磷酸三丁脂（TNBP）和非离子化的去污剂，如：Triton X-100或吐温-
80结合可以灭活脂包膜病毒，但对非脂包膜病毒无效。常用的灭活条件是0.3%TNBP和1%吐温-80，在24℃处理至少6小时；0.3%TNBP和1%Triton X-100，在24℃处理至少4小
时。S/D处理前应先用1μm滤器除去蛋白溶液中可能存在的颗粒（颗粒可能藏匿病毒从
而影响病毒灭活效果）。加入S/D后应确保是均一的混合物。在灭活病毒全过程中应将温度控制在规定的范围内。如果在加入S/D后过滤，则须检测过滤后S/D的浓度是否发生变
化，如有变化应进行适当调整。吐温-80应采用植物源性，并应采用称量法量取。
（四）膜过滤法
膜过滤技术只有在滤膜的孔径比病毒有效直径小时才能有效除去病毒。该方法不能单
独使用，应与其它方法联合使用。
验证研究时应考虑蛋白溶液的浓度、滤速、压力和过滤量等重要参数。在过滤前及过
滤后应测试滤膜的完整性。
（五）低pH孵放法
研究表明，免疫球蛋白生产工艺中的低pH（如pH4）处理（有时加胃酶）能灭活几种
脂包膜病毒。灭活条件（如：pH值、孵放时间和温度、胃酶含量、蛋白质浓度、溶质含量等因素）可能影响病毒灭活效果，验证试验应该研究这些参数允许变化的幅度。
三、特定的去除/灭活病毒方法验证
（一）指示病毒的选择
首先，应该选择经血液传播的相关病毒（如：HIV），不能用相关病毒的，要选择与其理化性质尽可能相似的指示病毒；第二，所选择的病毒理化性质应有代表性（病毒大小、核酸类型以及有无包膜），其中至少应包括一种对物理和/或化学处理有明显抗性的病毒。在进行去除/灭活病毒验证时，应根据制品的特性及所采用的病毒去除/灭活工艺，参照下表列举的病毒选择适宜的指示病毒。所选择的指示病毒至少应包括HIV-1、HBV和HCV
模拟病毒以及非脂包膜病毒。水疱性口炎病毒（VSV）耐受的pH范围比较广，验证低pH孵放法灭活病毒效果时可选用此指示病毒。
经血液传播疾病的相关病毒及验证可选用的指示病毒（举例）
┌──┬───┬───┬──────┬──────────────┐
│病毒│基因组│脂包膜│大小（nrn） │ 指示病毒举例 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HIV │ RNA │ 有 │ 80-100 │ HIV │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HBV │ DNA │ 有 │ 45 │鸭乙型肝炎病毒、伪狂犬病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HCV │ RNA │ 有 │ 40-60 │牛腹泻病毒、Sindbis病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│HAV │ RNA │ 无 │ 27 │HAV、脊髓灰质炎病毒、脑心肌 │
│ │ │ │ │炎（EMC）病毒 │
├──┼───┼───┼──────┼──────────────┤
│B19 │ DNA │ 无 │ 20 │犬细小病毒、猪细小病毒 │
└──┴───┴───┴──────┴──────────────┘
（二）方案设计
1．去除/灭活病毒验证研究应符合GLP的要求。
2．研究影响去除/灭活病毒效果的参数（包括机械参数和理化参数）允许变化的幅度。
3．研究病毒灭活动力学，包括病毒灭活速率和灭活曲线。
4．指示病毒滴度应该尽可能高（病毒滴度应≥106/ml）。
5．加入的病毒与待验证样品体积比不能高于1∶9。
6．如可能，验证过程中每步取出的样品应尽快直接进行病毒滴定，不做进一步处理（如超离心、透析或保存、除去抑制剂或毒性物质等）。如果样品必须做进一步处理，或不同时间取出的样品要在同一时间进行测定，应考虑这些处理方法对病毒检测结果的影响。
7．检测方法可包括蚀斑形成、细胞病变（如合胞体或病灶形成）、终点滴定或其他方法。这些方法应该有适宜的灵敏度和可重复性，每一个取样点应取双份样品并设有对照以保证结果的准确性。
8．如果制品的生产工艺中包含了两步或两步以上病毒去除/灭活方法，应该分别进行
病毒灭活效果验证。
（三）观察指标
1．病毒方面
（1）去除/灭活病毒滴度；
（2）灭活病毒速率、灭活曲线。以列表和做图形式报告验证结果。
2．病毒去除/灭活各参数允许变化范围
3．蛋白质方面
（1）制品质量应符合《中国生物制品规程》或有关规定；
（2）采用适当方法测定蛋白质结构和功能活性的变化。如：制品比活性、IVIG的Fc
功能分析可了解蛋白质结构是否发生了变化；凝胶色谱法可检测蛋白质分子大小和形状的变化；蛋白质形状变化可导致扩散系数、沉降常数和粘度的改变；SDS-PAGE，特别是等电聚焦和PAGE结合（双向电泳）也是检测蛋白质结构变化的很好方法。
（3）如果采用新的去除/灭活方法（包括更换使用已认可的病毒灭活方法或国内外未
曾采用过的病毒去除/灭活方法），需对蛋白质半衰期和新免疫原性进行研究。要求如下：
半衰期：用适宜动物（如大鼠或家兔）和未经病毒去除/灭活的相同制品进行半衰期比较；
新免疫原性：新免疫原性用来检查蛋白质较高级别结构上的变化。这些变化不一定损
害蛋白质功能，但是会引起受体免疫反应。实验室检测新免疫原性是非常困难的。可用经和未经病毒灭活的蛋白分别免疫动物（如家兔），所产生的抗体交叉用未经和经病毒灭活的蛋白结合。如果经病毒灭活的蛋白抗体被未经病毒灭活的蛋白完全结合，说明不含新抗原。由于不能保证人类免疫系统识别的表位与实验动物相同，因此推荐在Ⅳ期临床（获得生产文号后）开展是否有新抗原产生的研究。
（四）效果的判定
判断病毒去除/灭活的有效性须综合考虑，不能仅以病毒去除/灭活的量来确定。在确
定有效之前，必须考虑如下因素，审慎评价每次验证结果。
1．验证试验所选择的病毒是否适宜，病毒验证的设计是否合理。
2．病毒降低量（log10）≥4 logs，表示该步骤去除/灭活病毒有效。如因检测方法造成
病毒降低量＜4 logs时，应盲传三代，如无病毒检出，可认定是有效的灭活病毒方法。
3．病毒灭活动力学可更好的显示病毒灭活的效果。病毒灭活通常不是简单的一级反应。往往是起始反应速率快，其后变慢。如果病毒灭活速率随时间明显降低，表示该方法可能无效，或者残留的指示病毒对该灭活方法有抵抗力，说明该步病毒灭活方法无效。
4．病毒实际滴度为基础病毒，指示病毒与样品1:9的比例混匀后零点取样的病毒滴度，通过与经去除/灭活病毒后的测定的实际病毒残留量的比较，作为该病毒去除/灭活方法（步骤）实际的灭活病毒的量。
5．病毒检测敏感度的限值。
举例说明：
（1）加入6 logs 病毒，剩余4 logs 病毒，可将去除/灭活病毒的log数计算在生产全
过程中去除/灭活病毒总量之中，但是就此步（方法）去除/灭活病毒能力而言是无效的。
（2）加入6 logs 病毒，但由于制品本身的细胞毒作用使得检测灵敏度限值为4 logs ，
仅证明除去2 logs 的病毒。在此种情况下需改变试验设计重新进行验证。
（3）加入6 logs 病毒，但仍可测定2 logs 的剩余病毒，且清除病毒的量可重复出，
并不受工艺的影响，应认为是有效的去除/灭活病毒的方法。
（4）加入 6 logs病毒 ，之后未检测出病毒。但是由于检测灵敏度限值为2 logs ，仅
能认为大约清除或灭活了4 logs 病毒。事实上可能等于或大于4 logs ，因此应判定此方法
清除的病毒量≥4 logs。
（5）病毒灭活动力学是非常重要的观察指标。如巴氏消毒法（60℃，10小时），如果病毒残留量很快降到最低检出限度值，说明此方法灭活病毒效果很好。如果病毒灭活速率缓慢，在灭活结束时才达到最低检出限度值，不能认为是一个有效的病毒灭活方法。这就是说，评价验证结果不能仅考虑病毒降低量，同时也要考虑病毒灭活动力学。
四、生产工艺去除/灭活病毒能力的验证
生产工艺去除/灭活病毒能力验证参照特定的去除/灭活病毒方法验证的要求进行。需
要特殊考虑的问题有以下几方面：
（一）只对可能有去除/灭活病毒作用的生产步骤进行验证。
（二）模拟的生产工艺各种参数应尽可能与实际的生产工艺相一致，如pH、温度、蛋白质和其他组成成分的浓度、反应时间、层析柱的柱床高度及流速与床高的比例、洗脱图谱及该步骤的生产效果（如产量、比活性、组成成分）。应分析生产工艺中各种参数的偏差对病毒去除/灭活效果的影响。
（三）生产各步骤对不同类型病毒去除/灭活的选择性。
（四）核酸扩增技术（如PCR）检测病毒核酸的灵敏度比较高，但是该检测技术最大
的局限性是不能区别被灭活了还是未被灭活的病毒。因此该技术不能用于灭活病毒量的验证，只能用于生产过程中病毒去除量的验证。
（五）通常在生产过程中去除/灭活病毒量是可以计算在清除病毒总量中，但不能认定
是有效病毒去除步骤。因为生产过程通常有一些变化，很难控制及验证，而且，病毒分配完全取决于病毒特异的理化性质，这些理化性质影响了病毒与凝胶介质相互作用和沉淀的性质。因此由于病毒表面特性的微小差异（如：糖基化），指示病毒与靶病毒分配形式可能完全不同。在实验室增殖的相关病毒可能在分配上与野生株不同。然而，如果病毒降低量可重复，如果影响病毒分配的各生产参数可以适当地确定和控制，所要的组份能可靠的与一般公认的含病毒组份分开，就可以符合有效步骤的标准（即，认为是有效去除/灭活病毒步骤）。
（六）验证的目的是为了确定生产工艺去除/灭活病毒的能力，获得生产全过程中估计去除/灭活病毒的总量。一般降低的总量是各步降低病毒量的总和。但是由于病毒验证的局限性，如分步骤中病毒降低量≤1 log则不应将其计算在总量中。
五、去除/灭活病毒方法的再验证
以下几种情况需进行病毒去除/灭活方法的再验证：
（一）首次生产者，需对生产工艺中特定的去除/灭活病毒方法进行再验证；
（二）采用新工艺或对原有生产工艺进行了重大改革时，需对生产工艺进行清除病毒
能力验证；对特定的去除/灭活病毒方法进行去除/灭活病毒效果验证；
（三）工艺改变但不属重大工艺改革时，需对特定的去除/灭活病毒方法进行再验证；
（四）被灭活的中间品组成成分或pH值发生改变时，需对特定的去除/灭活病毒方法
进行再验证。
附录：
血液制品病毒去除/灭活验证申报程序
1、国家药品监督管理局授权中国药品生物制品检定所及其它认定的检测实验室进行病毒去除/灭活效果的验证工作。
2、血液制品生产企业应按本技术指导原则的要求对其生产工艺和特定的病毒去除/灭
活方法进行验证。如无条件，可委托其它单位进行去除/灭活病毒效果的验证。
3、血液制品生产企业在完成去除/灭活病毒效果验证后，向中国药品生物制品检定所
提出验证申请，并附制品生产工艺、质量标准、病毒灭活方法及其标准操作细则（SOP）、至少中试规模连续生产的三批病毒灭活前中间品（去除/灭活病毒前的样品）及其制造记录等相关资料。
4、中国药品生物制品检定所对生产单位提交的验证申请及相关的技术资料进行审核；对其提供的三批病毒灭活前的中间品进行与病毒去除/灭活方法相关的参数（如：pH、蛋白质浓度、水分及稳定剂含量、纯度等）的检测。
5、中国药品生物制品检定所及授权认定的检测实验室对生产单位提交的连续生产的三批病毒灭活前的中间品进行病毒灭活方法效果验证。授权认定的检测实验室在验证完成后将验证结果函告中国药品生物制品检定所。
6、在病毒去除/灭活验证的同时或验证后，中国药品生物制品检定所对申报单位提供
的连续生产的三批制品（批号可与病毒验证时报送的制品的批号不同，但必须是采用相同的生产工艺和病毒去除/灭活方法生产的制品）进行全面质量复核（按《中国生物制品规程》及有关的法定标准进行全检，出具检验报告）。
7、采用新的病毒去除/灭活方法时，在资料审查及病毒灭活效果验证结束后，由中国
药品生物制品检定所负责组织血液制品和病毒学等方面专家以及包括药品审评中心在内的相关部门的人员参加的技术论证会，对申报的病毒灭活方法进行论证。
8、验证结束后，中国药品生物制品检定所将去除/灭活病毒验证结果、综合评价意见
及三批制品检定报告回复申报单位；
9、申报单位将申报血液制品拟采用的病毒去除/灭活方法研究资料（包括相关文献）、企业自检报告和中国药品生物制品检定所及授权认定的检测实验室向生产单位提交的病毒去除/灭活方法验证结果、综合评价或论证意见、加入病毒去除/灭活工艺后的制品稳定性考核结果、中国药品生物制品检定所出具的三批制品检定报告等一并上报国家药品监督管理局予以审批。